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  分析方法
 
LC-2000高效液相色譜儀的樣品前處理測定方法
雙擊自動滾屏 發布者:鄭州寶晶電子科技有限公司 發布時間:2020/12/7 閱讀:9824

          鄭州寶晶電子科技有限公司的LC-2000高效液相色譜儀樣品前處理測定方法

1.流動相比例調整:

    由于我國藥品標準中沒有規定柱的長度及填料的粒度,因此每次新開檢新品種時幾乎都須調整流動相(按經驗,主峰一般應調至保留時間為6~15分鐘為宜)。所以建議第一次檢驗時請少配流動相,以免浪費。弱電解質的流動相其重現性更不容易達到,請注意充分平衡柱。

2.樣品配制:

①溶劑;

②容器:塑料容器常含有高沸點的增塑劑,可能釋放到樣品液中造成污染,而且還會吸留某些藥物,引起分析誤差。某些藥物特別是堿性藥物會被玻璃容器表面吸附,影響樣品中藥物的定量回收,因此必要時應將玻璃容器進行硅烷化處理。

3.記錄時間:

第一次測定時,應先將空白溶劑、對照品溶液及供試品溶液各進一針,并盡量收集較長時間的圖譜(如30分鐘以上),以便確定樣品中被分析組分峰的位置、分離度、理論板數及是否還有雜質峰在較長時間內才洗脫出來,確定是否會影響主峰的測定。

4.進樣量:

藥品標準中常標明注入10ml,而目前多數HPLC系統采用定量環(10ml、20ml和50ml),因此應注意進樣量是否一致。(可改變樣液濃度)

5.計算:

由于有些對照品標示含量的方式與樣品標示量不同,有些是復合鹽、有些含水量不同、有些是鹽基不同或有些是采用有效部位標示,檢驗時請注意。

6.儀器的使用:

①流動相濾過后,注意觀察有無肉眼能看到的微粒、纖維。有請重新濾過。

②柱在線時,增加流速應以0.1ml/min的增量逐步進行,一般不超過1ml/min,反之亦然。否則會使柱床下塌,叉峰。柱不線時,要加快流速也需以每次0.5ml/min的速率遞增上去(或下來),勿急升(降),以免泵損壞。

③安裝柱時,請注意流向,接口處不要留有空隙。

④樣品液請注意濾過(注射液可不需濾過)后進樣,注意樣品溶劑的揮發性。

⑤測定完畢請用水沖柱1小時,甲醇30分鐘。如果第二天仍使用,可用水以低流速(0.1~0.3ml/min)沖洗過夜(注意水要夠量),不須沖洗甲醇。另外需要特別注意的是:對于含碳量高、封尾充分的柱,應先用含5~10%甲醇的水沖洗,再用甲醇沖洗。

⑥沖水的同時請用水充分沖洗柱頭(如有自動清洗裝置系統,則應更換水)。

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